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• 1，試設(shè)計2個以上的克隆動物的試驗方案并闡述過程
• 2，怎樣試驗植物開花的時間與溫度有關(guān)
• 3，我在做準(zhǔn)備試驗想提前配制好酚酞指示劑這種東西容易變質(zhì)么
• 4，15類藥品申請專利在證明其有效性時需不需要做到臨床試驗?zāi)剡€是
• 5，動物染色體的制備實驗中為什么要用不同濃度的檸檬酸鈉
• 6，細(xì)菌的動力試驗是怎么做的
• 7，給藥劑量臨床常用量動物等效面積系數(shù)培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度中培養(yǎng)

1，試設(shè)計2個以上的克隆動物的試驗方案并闡述過程

你可以參考一下多利羊的產(chǎn)生過程啊，基本上就是這樣。其實現(xiàn)在的克隆只是擬克隆，還是要涉及到性細(xì)胞的使用，如果是真正意義上的克隆 ，應(yīng)該完全用體細(xì)胞來完成。

2，怎樣試驗植物開花的時間與溫度有關(guān)

植物開花的時間與濕度、溫度有關(guān)，與動物沒有關(guān)系。所以這句話不對。

一個在溫棚里栽種，一個在室外栽種，在濕度，陽光，氧氣等其他因素一致時，作出比較，

3，我在做準(zhǔn)備試驗想提前配制好酚酞指示劑這種東西容易變質(zhì)么

酚酞(w為0.01)指示劑：溶解1g酚酞于90ml酒精與10ml水的混合液中。

不容易變質(zhì)，一般半年時間（不容易變質(zhì)的試劑都要求只能用半年，藥典規(guī)定的）內(nèi)都可以用

4，15類藥品申請專利在證明其有效性時需不需要做到臨床試驗?zāi)剡€是

首先是你的配方有沒有申請發(fā)明專利！ 如果已經(jīng)申請了 你和藥廠談好轉(zhuǎn)讓價格或者許可價格后！ 簽個轉(zhuǎn)讓協(xié)議或者許可合同 然后最好到知識產(chǎn)權(quán)局備案！ 希望我回答能幫助到你1

這需要根據(jù)具體情況來判斷。有的是不需要的，比如抗菌性的藥物，只需要體外培養(yǎng)（表面培養(yǎng)、試管培養(yǎng)）就可以。但是根據(jù)發(fā)明點，有的是需要人體實驗和動物實驗進行證明的。

5，動物染色體的制備實驗中為什么要用不同濃度的檸檬酸鈉

1)動物的選擇,一般用小鼠,其繁殖能力強,易于飼養(yǎng).我們常用的是它們的骨髓細(xì)胞和精巢,因其分裂指數(shù)較高,不用體外培養(yǎng)就可以得到分裂中期的細(xì)胞. 2)秋水仙素用量要注意,太多或處理時間過長，會導(dǎo)致染色體的過分凝縮或著絲點裂解，最終會引起染色體形態(tài)不正常，甚至被破壞或溶解。 3) 低滲處理很關(guān)鍵。低滲液的量、處理時間均與細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)。低滲過度，細(xì)胞會破裂；低滲不足則染色體在一起，分散不開。 4) 離心速度或離心時間也能影響染色體標(biāo)本的制備。離心速度過大或離心時間過長，則會引起細(xì)胞破裂；反之，離心速度過小或離心時間過短，則細(xì)胞沉降不下來，則會引起大量細(xì)胞的丟失。 5) 固定液要隨用隨配，固定徹底后再打散細(xì)胞團塊，否則細(xì)胞容易破碎，染色體分散亦受到影響。 6) 載玻片要預(yù)冷.冷卻不夠，則會影響染色體的附著和鋪展。 7) 用吸管吹散細(xì)胞時用力必須盡量輕柔，用力過大則會造成細(xì)胞破裂，而染色體也會彌散在溶液中，在隨后的離心中將會丟失。 8) 滴片時的高度很重要，高度過低細(xì)胞不會破裂；過高則染色體過于分散甚至丟失，無法辨別出染色體的準(zhǔn)確數(shù)量。

每種生物細(xì)胞的承受能力不同，它配出來的檸檬酸鈉要既能提取出成分，又要不破壞染色體。

6，細(xì)菌的動力試驗是怎么做的

首先需要配置好半固體培養(yǎng)基（半固體培養(yǎng)基相對于固體培養(yǎng)基，瓊脂含量少而顯得稀薄，利于有動力的細(xì)菌生長擴散）。接種時，使用接種針挑取少許待檢細(xì)菌，豎直做一個穿刺，但不要插到試管底部。培養(yǎng)后，如果動力為陽性，則可以看到穿刺線模糊，有明顯的擴散生長痕跡。如果動力陰性，則穿刺線明顯。

首先需要配置好半固體培養(yǎng)基（半固體培養(yǎng)基相對于固體培養(yǎng)基，瓊脂含量少而顯得稀薄，利于有動力的細(xì)菌生長擴散）。接種時，使用接種針挑取少許待檢細(xì)菌，豎直做一個穿刺，但不要插到試管底部。培養(yǎng)后，如果動力為陽性，則可以看到穿刺線模糊，有明顯的擴散生長痕跡。如果動力陰性，則穿刺線明顯。動力試驗是結(jié)構(gòu)試驗的內(nèi)容之一，借以觀察和研究飛行器結(jié)構(gòu)或構(gòu)件的基本動力特性以及在各種環(huán)境下的動態(tài)穩(wěn)定性和耐受能力，是驗證飛行器動態(tài)性能和動力分析正確性的重要手段。動力試驗的具體項目較多，主要的項目有動力特性試驗、顫振試驗、擺振試驗、落震試驗和振動沖擊環(huán)境試驗。

如果只做動力，使用半固體瓊脂即可，每個小試管2.5ml，高壓滅菌冷卻后即可使用。用接種針挑取所要檢測的細(xì)菌，垂直從半固體瓊脂表面插下去，插到離小試管底部只有5mm左右時再垂直抽回來，即做一條穿刺線，這樣就完成了接種。放在37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時可觀察結(jié)果（部分細(xì)菌培養(yǎng)溫度不同，由細(xì)菌的性質(zhì)決定），如果穿刺線清晰，未擴散，則表明動力陰性。如果穿刺線模糊，側(cè)光看可明顯觀察到穿刺線周圍有擴散生長的痕跡，則為陽性。擴展資料：通常測定細(xì)菌動力的方法有顯微鏡法（懸滴法、壓片法）和半固體瓊脂試管法，但這些方法都是定性的，若將半固體瓊脂試管法轉(zhuǎn)為平板法，確定實驗條件,可以準(zhǔn)確定量測定細(xì)菌動力。動力實驗使用的是半固體瓊脂培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基因為含瓊脂量比較少，使用待測菌進行穿刺接種之后進行培養(yǎng)，如果有動力，那么細(xì)菌就可以在這樣的瓊脂內(nèi)進行穿行，從而造成穿刺線模糊，可以觀察到細(xì)菌沿穿刺線周圍擴散生長。參考資料來源：百度百科-動力試驗

做細(xì)菌的動力試驗首先需要配置好半固體培養(yǎng)基（半固體培養(yǎng)基相對于固體培養(yǎng)基，瓊脂含量少而顯得稀薄，利于有動力的細(xì)菌生長擴散）。接種時，使用接種針挑取少許待檢細(xì)菌，豎直做一個穿刺，但不要插到試管底部。培養(yǎng)后，如果動力為陽性，則可以看到穿刺線模糊，有明顯的擴散生長痕跡。如果動力陰性，則穿刺線明顯。

7，給藥劑量臨床常用量動物等效面積系數(shù)培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度中培養(yǎng)

有限稀釋法是一種常用的克隆方法。 將需要再克隆的細(xì)胞株自培養(yǎng)孔內(nèi)吸出并作細(xì)胞計數(shù)，計出1mL的細(xì)胞數(shù)。 用HT培養(yǎng)液稀釋， 使細(xì)胞濃度為50～60個/mL，于96孔培養(yǎng)板中每孔加0.1mL(五六個細(xì)胞/孔)。接種2排，剩余細(xì)胞懸液用HT培養(yǎng)液作倍比稀釋，再接種2排，如此類推，直至使每孔含0.5～1個細(xì)胞。培養(yǎng)7～10d后，選擇單個克隆生長的陽性孔再一次進行克隆。一般需要如此重復(fù)3～5次，直至達(dá)100％陽性孔率時即可，以確?？贵w由單個克隆所產(chǎn)生。例如： 實驗細(xì)胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)—有限稀釋法一、實驗?zāi)康模?1、掌握用有限稀釋法進行細(xì)胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)； 2、學(xué)會細(xì)胞克隆形成的辯觀察技能； 3、配合抗體分泌細(xì)胞篩選技術(shù)，確定抗體分泌細(xì)胞。 二、實驗原理： 克隆化培養(yǎng)即單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，用有限稀釋法進行雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)，可以及時確定陽性雜交瘤細(xì)胞株，同時淘汰因發(fā)生染色體丟失或抗體的輕、重鏈基因分離而出現(xiàn)無抗體分泌陰性細(xì)胞株。 一般雜交瘤細(xì)胞需經(jīng)過52—3次反復(fù)克隆后，才能達(dá)到100%細(xì)胞陽性率。 該辦法亦適用于一般細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞純化、突變細(xì)胞株的選擇，識別和分離。是細(xì)胞株的常用方法。 三、實驗材料： 雜交瘤細(xì)胞、25毫升培養(yǎng)瓶、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（天津有機玻璃廠）、移液管（1毫升、5毫升、10毫升）、彎頭滴管、倒置顯微鏡、CO2培養(yǎng)箱、白細(xì)胞計數(shù)板、計數(shù)器、蓋玻片、防水筆、RPMI-1640、小牛血清、青鏈霉素、10毫升刻度離心管，00橡膠塞，飼養(yǎng)細(xì)胞（3-6×105/ml、見腹腔細(xì)胞的制備）。 四、實驗步驟： 1、分裝了每孔0.1毫升腹腔細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（可提前24小時準(zhǔn)備就緒，置CO2培養(yǎng)箱中備用）； 2、自細(xì)胞培養(yǎng)瓶中收集長勢良好的雜交瘤細(xì)胞（亦可自24孔培養(yǎng)板孔中收集），制成懸液。3、按白細(xì)胞計數(shù)方法準(zhǔn)確計得細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)，一般在105/毫升左右。 4、取3支10毫升刻度離心管排列在超凈工作臺試管架上，先用無血清培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至103/毫升，再用含15%小牛血清的完全培養(yǎng)基稀釋到101/毫升細(xì)胞，即每0.1毫升1個細(xì)胞。 5、每孔0.1毫升細(xì)胞懸液。 6、置37℃5%CO2培養(yǎng)箱，4天后取出觀察，并在板蓋上打上標(biāo)記，做好記錄并統(tǒng)計結(jié)果。 7、繼續(xù)培養(yǎng)時，則在第4-5天更換1/2培養(yǎng)基，約第7-9天可以收獲培養(yǎng)液上清用于檢測抗體。并重復(fù)檢測1-2次。 8、選擇單克隆生長孔，生長良好，陽性強者，轉(zhuǎn)移到24孔板再做克隆經(jīng)培養(yǎng)或擴大培養(yǎng)。 五、實驗結(jié)果： 實驗結(jié)果以總細(xì)胞孔（如96孔）中出現(xiàn)克隆孔統(tǒng)計出克隆百分率，并可進一步按單細(xì)胞孔、雙細(xì)胞孔、多細(xì)胞孔分別計算出百分率。 六、注意事項： 1、注意無菌操作，一旦發(fā)現(xiàn)污染（孔）必須及時處理； 2、計數(shù)細(xì)胞要求準(zhǔn)確，稀釋量亦要準(zhǔn)確，否則將造成一孔多細(xì)胞克隆或克隆百分離太低； 3、在計數(shù)克隆出現(xiàn)率之前，不宜更換培養(yǎng)液，也不宜強烈振動培養(yǎng)板； 4、做克隆化培養(yǎng)的小牛血清必須是優(yōu)質(zhì)血清； 5、若做克隆抗體檢測時，特別要保護細(xì)胞的生長狀況，防止細(xì)胞生長不良甚至丟失。 七、說明： 哺乳動物細(xì)胞通過分離、稀釋接種，培養(yǎng)在適宜于單細(xì)胞生長的培養(yǎng)液中，形成細(xì)胞克隆。運用這項技術(shù)可以制作細(xì)胞成活曲線，即在接種相同數(shù)量細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中，加入不同濃度的化學(xué)藥品，或照以不同劑量的射線，觀察其對細(xì)胞的聽見害程度。由此可以在哺乳類細(xì)胞中進行誘變試驗及分離突變細(xì)胞。

雖然我很聰明，但這么說真的難到我了

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