在給藥前試驗動物通常,實驗動物的常用給藥方法包括哪些
發(fā)布時間:2022-09-17 12:51
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本文目錄一覽實驗動物的常用給藥方法包括哪些2,動物實驗要求每天給藥時間一致這是因為B3,動物實驗常用動物及給藥方法有哪些4,在許多藥物實驗中通常都用老鼠做實驗這是為什么5,做臨床前需要做動物實驗這個做動物實驗的單位有什么特別要求嗎6,藥……
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1,實驗動物的常用給藥方法包括哪些

2,動物實驗要求每天給藥時間一致這是因為 B

3,動物實驗常用動物及給藥方法有哪些
常用動物有小鼠,大鼠,兔,蟾蜍等。主要給藥方法有喂食(將藥摻入水或食物中),靜脈注射,腹腔注射等。
4,在許多藥物實驗中通常都用老鼠做實驗這是為什么
白老鼠比其他動物的抗藥性低。只有對藥物低抗低才能更好的實驗。你好,因為老鼠的特性和人是非常相近的,用老鼠做實驗可以達到很好的效果。
5,做臨床前需要做動物實驗這個做動物實驗的單位有什么特別要求嗎
藥物臨床前試驗即使藥物安全性評價,你需要到有GLP認證的單位去做。只要通過了GLP認證,公司和事業(yè)單位都可以去做你的實驗。不知道你在哪里,我知道北京的話,國家藥品生物制品檢定所的安全評級中心做的最好,當然可信度最強,但是可能也貴,其他的還有附屬于中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所的康藍生物技術(shù)公司也可以做。
6,藥物研發(fā)過程中的動物實驗階段會出現(xiàn)哪些問題
不僅是動物實驗,還必須有人體實驗。所有新藥上市前必須經(jīng)過臨床試驗:Ⅰ期臨床試驗在新藥開發(fā)過程中,將新藥第一次用于人體以研究新藥的性質(zhì)的試驗,稱之為Ⅰ期臨床試驗.即在嚴格控制的條件下,給少量試驗藥物于少數(shù)經(jīng)過謹慎選擇和篩選出的健康志愿者(對腫瘤藥物而言通常為腫瘤病人),然后仔細監(jiān)測藥物的血液濃度排泄性質(zhì)和任何有益反應或不良作用,以評價藥物在人體內(nèi)的性質(zhì).Ⅰ期臨床試驗通常要求健康志愿者住院以進行24小時的密切監(jiān)護.隨著對新藥的安全性了解的增加,給藥的劑量可逐漸提高,并可以多劑量給藥.通過Ⅰ期臨床試驗,還可以得到一些藥物最高和最低劑量的信息,以便確定將來在病人身上使用的合適劑量.可見,Ⅰ期臨床試驗是初步的臨床藥理學及人體安全性評價試驗,目的在于觀測人體對新藥的耐受程度和藥代動力學,為制定給藥方案提供依據(jù).Ⅱ期臨床試驗通過Ⅰ期臨床研究,在健康人身上得到了為達到合理的血藥濃度所需要的藥品的劑理的信息,即藥代動力學數(shù)據(jù).但是,通常在健康的人體上是不可能證實藥品的治療作用的.在臨床研究的第二階段即Ⅱ期臨床試驗,將給藥于少數(shù)病人志愿者,然后重新評價藥物的藥代動力學和排泄情況.這是因為藥物在患病狀態(tài)的人體內(nèi)的作用方式常常是不同的,對那些影響腸、胃、肝、和腎的藥物尤其如此。以一個新的治療關(guān)節(jié)炎的止通藥的開發(fā)為例。Ⅱ期臨床研究將確定該藥緩解關(guān)節(jié)炎病人的疼通效果如何,還要確定在不同劑量時不良反應的發(fā)生率的高低,以確定疼痛得到充分緩解但不良反應最小的劑量。可以說,Ⅱ期臨床試驗是對治療作用的初步評價階段。Ⅱ期臨床試驗一般通過隨機盲法對照試驗(根據(jù)具體目的也可以采取其他設計形式),對新藥的有效性和安全性作出初步評價,并為設計Ⅲ期臨床試驗和確定給藥劑量方案提供依據(jù)。Ⅲ期臨床試驗在Ⅰ,Ⅱ期臨床研究的基礎上,將試驗藥物用于更大范圍的病人志愿者身上,進行擴大的多中心臨床試驗,進一步評價藥物的有效性和耐受性(或安全性),稱之為Ⅲ期臨床試驗。Ⅲ期臨床試驗可以說是治療作用的確證階段,也是為藥品注冊申請獲得批準提供依據(jù)的關(guān)鍵階段,該期試驗一般為具有足夠樣本量的隨機化盲法對照試驗。臨床試驗將對試驗藥物和安慰劑(不含活性物質(zhì))或已上市藥品的有關(guān)參數(shù)進行比較。試驗結(jié)果應當具有可重復性??梢哉f,該階段是臨床研究項目的最繁忙和任務最集中的部分。除了對成年病人研究外,還要特別研究藥物對老年病人,有時還要包括兒童的安全性。一般來講,老年病人和危重病人所要求的劑量要低一些,因為他們的身體不能有產(chǎn)地清除藥物,使得他們對不良反應的耐受性更差,所以應當進行特別的研究來確定劑量。而兒童人群具有突變敏感性、遲發(fā)毒性和不同的藥物代謝動力學性質(zhì)等特點,因此在決定藥物應用于兒童人群時,權(quán)衡療效和藥物不良反應應當是一個需要特別關(guān)注的問題。在國外,兒童參加的臨床試驗一般放在成人試驗的Ⅲ期臨床后才開始。如果一種疾病主要發(fā)生在兒童,并且很嚴重又沒有其他治療方法,美國食品與藥品管理局允許Ⅰ期臨床試驗真接從兒童開始,即在不存在成人數(shù)據(jù)參照的情況下,允許從兒童開始藥理評價。我國對此尚無明確規(guī)定。上述任何一步反饋得到的結(jié)果不好,都有可能讓一個候選藥物胎死腹中。最悲慘的結(jié)果可能是這個項目就直接被取消了。
7,給藥劑量臨床常用量動物等效面積系數(shù)培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度中培養(yǎng)
有限稀釋法是一種常用的克隆方法。 將需要再克隆的細胞株自培養(yǎng)孔內(nèi)吸出并作細胞計數(shù),計出1mL的細胞數(shù)。 用HT培養(yǎng)液稀釋, 使細胞濃度為50~60個/mL,于96孔培養(yǎng)板中每孔加0.1mL(五六個細胞/孔)。接種2排,剩余細胞懸液用HT培養(yǎng)液作倍比稀釋,再接種2排,如此類推,直至使每孔含0.5~1個細胞。培養(yǎng)7~10d后,選擇單個克隆生長的陽性孔再一次進行克隆。一般需要如此重復3~5次,直至達100%陽性孔率時即可,以確保抗體由單個克隆所產(chǎn)生。例如: 實驗細胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)—有限稀釋法一、實驗目的: 1、掌握用有限稀釋法進行細胞克隆化培養(yǎng)技術(shù); 2、學會細胞克隆形成的辯觀察技能; 3、配合抗體分泌細胞篩選技術(shù),確定抗體分泌細胞。 二、實驗原理: 克隆化培養(yǎng)即單細胞培養(yǎng)技術(shù),用有限稀釋法進行雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng),可以及時確定陽性雜交瘤細胞株,同時淘汰因發(fā)生染色體丟失或抗體的輕、重鏈基因分離而出現(xiàn)無抗體分泌陰性細胞株。 一般雜交瘤細胞需經(jīng)過52—3次反復克隆后,才能達到100%細胞陽性率。 該辦法亦適用于一般細胞培養(yǎng)中的細胞純化、突變細胞株的選擇,識別和分離。是細胞株的常用方法。 三、實驗材料: 雜交瘤細胞、25毫升培養(yǎng)瓶、96孔細胞培養(yǎng)板(天津有機玻璃廠)、移液管(1毫升、5毫升、10毫升)、彎頭滴管、倒置顯微鏡、CO2培養(yǎng)箱、白細胞計數(shù)板、計數(shù)器、蓋玻片、防水筆、RPMI-1640、小牛血清、青鏈霉素、10毫升刻度離心管,00橡膠塞,飼養(yǎng)細胞(3-6×105/ml、見腹腔細胞的制備)。 四、實驗步驟: 1、分裝了每孔0.1毫升腹腔細胞的96孔細胞培養(yǎng)板(可提前24小時準備就緒,置CO2培養(yǎng)箱中備用); 2、自細胞培養(yǎng)瓶中收集長勢良好的雜交瘤細胞(亦可自24孔培養(yǎng)板孔中收集),制成懸液。3、按白細胞計數(shù)方法準確計得細胞懸液的細胞數(shù),一般在105/毫升左右。 4、取3支10毫升刻度離心管排列在超凈工作臺試管架上,先用無血清培養(yǎng)基將細胞稀釋至103/毫升,再用含15%小牛血清的完全培養(yǎng)基稀釋到101/毫升細胞,即每0.1毫升1個細胞。 5、每孔0.1毫升細胞懸液。 6、置37℃5%CO2培養(yǎng)箱,4天后取出觀察,并在板蓋上打上標記,做好記錄并統(tǒng)計結(jié)果。 7、繼續(xù)培養(yǎng)時,則在第4-5天更換1/2培養(yǎng)基,約第7-9天可以收獲培養(yǎng)液上清用于檢測抗體。并重復檢測1-2次。 8、選擇單克隆生長孔,生長良好,陽性強者,轉(zhuǎn)移到24孔板再做克隆經(jīng)培養(yǎng)或擴大培養(yǎng)。 五、實驗結(jié)果: 實驗結(jié)果以總細胞孔(如96孔)中出現(xiàn)克隆孔統(tǒng)計出克隆百分率,并可進一步按單細胞孔、雙細胞孔、多細胞孔分別計算出百分率。 六、注意事項: 1、注意無菌操作,一旦發(fā)現(xiàn)污染(孔)必須及時處理; 2、計數(shù)細胞要求準確,稀釋量亦要準確,否則將造成一孔多細胞克隆或克隆百分離太低; 3、在計數(shù)克隆出現(xiàn)率之前,不宜更換培養(yǎng)液,也不宜強烈振動培養(yǎng)板; 4、做克隆化培養(yǎng)的小牛血清必須是優(yōu)質(zhì)血清; 5、若做克隆抗體檢測時,特別要保護細胞的生長狀況,防止細胞生長不良甚至丟失。 七、說明: 哺乳動物細胞通過分離、稀釋接種,培養(yǎng)在適宜于單細胞生長的培養(yǎng)液中,形成細胞克隆。運用這項技術(shù)可以制作細胞成活曲線,即在接種相同數(shù)量細胞的培養(yǎng)瓶中,加入不同濃度的化學藥品,或照以不同劑量的射線,觀察其對細胞的聽見害程度。由此可以在哺乳類細胞中進行誘變試驗及分離突變細胞。

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